成果概要：

    幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）是一种能长期定植于胃黏膜的致病菌，革兰染色阴性，弯曲状或轻微螺旋状，长2.5~5mm，粗0.5mm的细菌。该菌通常在胃小凹及腺腔内，呈不均匀的集团状分布。可分泌多种外毒素，使胃黏膜上皮损伤，分泌的过氧化氢酶、脂肪酶、磷酸酶、蛋白水解酶以及毒素等，均可损伤胃上皮细胞，引起胃黏膜炎症改变。研究表明，幽门螺杆菌感染与慢性胃炎、消化性溃疡等胃部疾病密切相关，并被WHO确认为胃癌的第一因素。慢性胃炎是困扰我国各个人群的常见病，继2000年第一次慢性胃炎共识后，2006年的《中国慢性胃炎共识意见》中重申了长期幽门螺杆菌的感染不仅可使部分患者的消化不良症状得到长期改善，还有利于胃癌的预防。

         诊断是否存在Hp感染，最准确的方法是病原学检查，即细菌的培养，该法的特异性可达100%，，常作为幽门螺杆菌检测的“金标准”。另外，只要Hp培养成菌落，除了可用各种方法鉴定外，还可以对不同来源的细菌进行体外药敏试验，对治疗幽门螺杆菌具有较好的针对性，从而提高Hp根除率。幽门螺杆菌是寄居于环境复杂的胃部，原代培养时，对气体的要求比较严格，一般为2%~5%的氧气，最高不超过3%~7%。培养基的pH值，在中性或稍偏碱性时最好。目前，临床上多直接用无菌试管或用无菌肉汤管作为细菌培养用标本运送液运送标本。但这两个方法均无法用于幽门螺杆菌标本的运送：由于用无菌试管或用无菌肉汤作为运送液在室温保存条件下保存超过5小时，标本中的幽门螺杆菌即已死亡，从而出现假阴性的培养结果。临床上无法开展幽门螺杆菌的常规培养，主要可能是因为没有合适的用于胃活检组织标本幽门螺杆菌培养用运送液之故。

         目前为止，在幽门螺杆菌的研究中有运用生理盐水，stuart运送液，markus输送液等用于标本的运送，起运的温度在-20℃或4℃。生理盐水成分单一，且因未加抗菌物质，容易受杂菌污染，另外在室温条件下超过4h幽门螺杆菌即死亡，即使在4℃保存也不应超过5h，因此生理盐水可作为快速或短距离的标本的运送液。stuart运送液营养成分较好，但未加抗生素，易造成杂菌污染，因加入盐酸半胱氨酸和硫代硫酸钠，使得液体呈酸性，不利于组织及其中的细菌的存活。Markus输送液以布氏肉汤为基础，加入小牛血清增加营养及蛋白含量，溶液也呈酸性。stuart运送液和Markus输送液均加入0.1~1%的琼脂增加粘性以隔离空气，由于琼脂在室温下为凝固状态，在把标本放入的过程中易形成断层，从而使组织标本未能与空气完全隔绝，影响细菌的存活能力，不是一个很好的增加黏性的物质。

         本研究（专利号ZL201010263492.5）涉及一种微生物培养用运送液及其制备方法和应用，具体涉及胃活检组织标本幽门螺杆菌培养用运送液及其制备方法和应用。本发明通过提高粘度、适当提高酸碱度、增加坑杂菌药物，有利于活检组织中幽门螺杆菌的存活，延长标本保存时间。本发明具有很好的实用价值，取材后24h内送检不影响细菌的检出率，24h内室温保存幽门螺杆菌存活率达到50%以上，适用于各级医院和检验机构的检测应用。

项目联系人：杜季梅  副教授

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